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實時熒光定量PCR儀—通過實時監(jiān)測熒光信號變化,實現(xiàn)核酸的定性和定量分析

更新時間:2025-11-04      點擊次數(shù):177

【型號推薦:TH-H160,氣象環(huán)境監(jiān)測儀器設(shè)備生產(chǎn)廠家,云境天合支持商家定制服務(wù),設(shè)備選擇山東云境天合您放心】實時熒光定量PCR儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的高精度核酸分析設(shè)備,通過實時監(jiān)測熒光信號變化,實現(xiàn)核酸的定性和定量分析。其核心原理是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記的探針或染料,利用熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成同步的特點,精確測定樣本中目標(biāo)DNA或RNA的初始含量。該儀器具備高靈敏度、高特異性、寬線性范圍及快速自動化等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于基因表達分析、病原體檢測、遺傳病診斷、腫瘤標(biāo)志物篩查等領(lǐng)域。其多通道光學(xué)檢測系統(tǒng)支持多種熒光染料同步檢測,結(jié)合高精度溫控模塊,可實現(xiàn)高效、準(zhǔn)確的核酸擴增與定量分析,是分子生物學(xué)研究和臨床診斷的重要工具。

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實時熒光定量PCR系統(tǒng)簡介
實時熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運行實時熒光定量PCR實驗,通過熒光激發(fā)和采集的方式,對實驗過程進行實時監(jiān)控,將實驗過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線,實時呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對實驗數(shù)據(jù)進行擬合和分析,最后可生成PDF格式的實驗報告。

對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本(如血液,體液等)中包含的目標(biāo)核酸,進行快速精準(zhǔn)的定性和定量分析,同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M行標(biāo)準(zhǔn)曲線,熔解曲線,基因分型等分析。

基本原理

實時熒光定量PCR儀器的原理:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA擴增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點,是基因擴增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。

實時熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針,在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號變化,對整個PCR進程進行實時檢測,以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。

實時熒光定量PCR系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域

◆食源性致病菌檢測
◆動植物源性檢測
◆植物科學(xué)與農(nóng)業(yè)生物技術(shù)
◆基因突變及多態(tài)性
◆基礎(chǔ)科學(xué)研究
◆水體監(jiān)測
◆病原核酸檢測
◆ 轉(zhuǎn)基因檢測
◆動物疫情監(jiān)測
◆食品衛(wèi)生檢疫
◆海關(guān)進出口檢疫

儀器基本結(jié)構(gòu)

實時熒光定量PCR系統(tǒng)是實時檢測反應(yīng)的儀器,主要由基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計算機及應(yīng)用軟件組成。其中兩個核心功能模塊:熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實時檢測系統(tǒng)。其中基因擴增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴增儀工作原理基本相同,采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。

儀器特點:

1、體積小,重量輕,方便攜帶,兼容0.2PCR單管、八聯(lián)管;

2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導(dǎo)體芯片,新一代半導(dǎo)體升降溫技術(shù),最快變溫速率可達每秒7度,使用壽命可達一百萬次循環(huán);

3、采用的采光檢測處理技術(shù),自動調(diào)節(jié)熒光本底,提高熒光信號靈敏度和信噪比,獲得更佳結(jié)果;

4、13S四通道快速采光,熒光采集信號穩(wěn)定,減少延時誤差;
      5、采用免維護的長壽命LED光源,無需更換,獨立熒光通道,不同通道之間的串?dāng)_更??;
6、 恒流式控制電路,功率輸出平滑,延長 Peltier壽命,提高控溫精度;
7、具有過流、過溫、瞬時斷電數(shù)據(jù)自恢復(fù)等保護功能,儀器重啟后繼續(xù)運行未完成實驗,確保實驗安全運行;
8、強大的軟件分析功能,可以進行定量分析,熔解曲線分析,基因分型等,分析軟件升級,支持不同行業(yè)的軟件定制;
9、支持恒溫、熒光定量雙模式,適配市面上多數(shù)的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒;
10、自帶10寸彩色觸摸屏控制,也可以連接電腦控制。

儀器技術(shù)指標(biāo)
“///" 符號表示國家標(biāo)準(zhǔn)目前沒有定義該項指標(biāo)或者強制性要求。

指標(biāo)名稱H160H320H480
外觀
外形尺寸235mm*385mm*175mm(寬*深*高)
重量5.6kg5.7kg5.8Kg
電氣參數(shù)~220V/50Hz,255W
數(shù)據(jù)接口USB 2.0 *2(右側(cè)兩個)
環(huán)境參數(shù)
運行條件溫度:10-30℃,濕度:20%~80%
運輸及貯存條件溫度:-20~55℃,濕度:20%~80%
海拔高度<2500米
噪聲等級A計權(quán),<60dB
樣本參數(shù)
樣本容量16*0.2mL32*0.2mL48*0.2mL
試管類型單管,八聯(lián)排試管
樣本容積15-100uL
溫度特性
加熱/冷卻方式半導(dǎo)體加熱/制冷
溫度范圍4℃-99℃
最大升溫速率≥5.5℃/s
平均升溫速率≥3.5℃/s
最大降溫速率≥4.5℃/s
平均降溫速率≥2.5℃/s
控溫精度≤±0.01℃
溫度準(zhǔn)確度≤±0.1℃
溫度均勻性≤±0.3℃
光學(xué)特性
熒光檢測通道數(shù)4通道
發(fā)光器件高亮度LED
采光器件高靈敏度,高信噪比光電二極管
適配探針或染料第一通道:470/520 FAM,SYBR Green
第二通道:530/570 HEX,JOE,VIC
第三通道:580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red
第四通道:630/670 CY5
檢測靈敏度1個拷貝
線性檢測范圍100~1010個拷貝
線性相關(guān)系數(shù)≥0.999
通道交叉串?dāng)_無串?dāng)_
檢測重復(fù)性≤1.0%



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